Kiitos käynnistäsi Nature.com-sivustolla. Käyttämäsi selainversio tukee CSS:ää rajoitetusti. Parhaan käyttökokemuksen saavuttamiseksi suosittelemme käyttämään päivitettyä selainta (tai poistamaan yhteensopivuustilan käytöstä Internet Explorerissa). Sillä välin tuen jatkuvuuden varmistamiseksi renderöimme sivuston ilman tyylejä ja JavaScriptiä.
Useimmat hiirillä tehtävät aineenvaihduntatutkimukset tehdään huoneenlämmössä, vaikka näissä olosuhteissa, toisin kuin ihmisillä, hiiret käyttävät paljon energiaa sisäisen lämpötilan ylläpitämiseen. Tässä tutkimuksessa kuvailemme normaalipainoista ja ruokavalion aiheuttamaa lihavuutta (DIO) C57BL/6J-hiirillä, joille syötettiin joko chow chow'ta tai 45 % rasvaa sisältävää ruokavaliota. Hiiret asetettiin 33 päiväksi 22, 25, 27,5 ja 30 °C:n lämpötiloihin epäsuoraan kalorimetriajärjestelmään. Osoitamme, että energiankulutus kasvaa lineaarisesti 30 °C:sta 22 °C:seen ja on noin 30 % suurempi 22 °C:ssa molemmissa hiirimalleissa. Normaalipainoisilla hiirillä ruoan saanti kumosi EE:n. Sitä vastoin DIO-hiiret eivät vähentäneet ruoan saantia, kun EE väheni. Siten tutkimuksen lopussa hiirillä oli 30 °C:ssa suurempi ruumiinpaino, rasvamassa sekä plasman glyseroli- ja triglyseridipitoisuudet kuin hiirillä 22 °C:ssa. DIO-hiirten epätasapaino voi johtua lisääntyneestä nautintoperusteisesta ruokavaliosta.
Hiiri on yleisimmin käytetty eläinmalli ihmisen fysiologian ja patofysiologian tutkimuksessa, ja se on usein oletusarvoinen eläin lääkekehityksen alkuvaiheissa. Hiiret eroavat kuitenkin ihmisistä useilla tärkeillä fysiologisilla tavoilla, ja vaikka allometristä skaalausta voidaan jossain määrin soveltaa ihmisiin, hiirten ja ihmisten väliset suuret erot ovat lämmönsäätelyssä ja energian tasapainossa. Tämä osoittaa perustavanlaatuisen ristiriidan. Aikuisten hiirten keskimääräinen ruumiinmassa on vähintään tuhat kertaa pienempi kuin aikuisten (50 g vs. 50 kg), ja pinta-alan suhde massaan eroaa noin 400 kertaa Meen kuvaaman epälineaarisen geometrisen muutoksen vuoksi. Yhtälö 2. Tämän seurauksena hiiret menettävät merkittävästi enemmän lämpöä suhteessa tilavuuteensa, joten ne ovat herkempiä lämpötilalle, alttiimpia hypotermialle ja niiden keskimääräinen perusaineenvaihdunta on kymmenen kertaa korkeampi kuin ihmisillä. Normaalissa huoneenlämmössä (~22 °C) hiirten on lisättävä kokonaisenergiankulutustaan (EE) noin 30 % ylläpitääkseen ydinruumiin lämpötilaa. Alhaisemmissa lämpötiloissa EE kasvaa vielä enemmän, noin 50 % ja 100 % 15 ja 7 °C:ssa verrattuna EE:hen 22 °C:ssa. Siten tavanomaiset asumisolosuhteet aiheuttavat kylmästressivasteen, mikä voi vaarantaa hiiritulosten siirrettävyyden ihmisille, koska nykyaikaisissa yhteiskunnissa elävät ihmiset viettävät suurimman osan ajastaan termoneutraaleissa olosuhteissa (koska alhaisempi pinta-alan suhde tilavuuteen tekee meistä vähemmän herkkiä lämpötilalle, koska luomme ympärillemme termoneutraalin vyöhykkeen (TNZ). EE on perusaineenvaihdunnan yläpuolella) ja ulottuu noin 19–30 °C:seen6, kun taas hiirillä tämä vyöhyke on korkeampi ja kapeampi, vain 2–4 °C:seen7,8. Itse asiassa tähän tärkeään näkökohtaan on kiinnitetty huomattavaa huomiota viime vuosina4, 7,8,9,10,11,12, ja on ehdotettu, että joitakin "lajien välisiä eroja" voidaan lieventää nostamalla kuoren lämpötilaa9. Hiirten termoneutraaliuden lämpötila-alueesta ei kuitenkaan ole yksimielisyyttä. Näin ollen on kiistanalaista, onko yksipolvisilla hiirillä termoneutraalin alueen alempi kriittinen lämpötila lähempänä 25 °C:ta vai lähempänä 30 °C:ta4, 7, 8, 10, 12. EE ja muut aineenvaihduntaparametrit ovat rajoittuneet tunneihin tai päiviin, joten on epäselvää, missä määrin pitkäaikainen altistuminen eri lämpötiloille voi vaikuttaa aineenvaihduntaparametreihin, kuten painoon. Lisäksi tarvitaan lisätutkimuksia sen selvittämiseksi, missä määrin ruokavalio voi vaikuttaa näihin parametreihin (DIO-hiiret, joilla on runsasrasvainen ruokavalio, saattavat olla suuntautuneempia nautintopohjaiseen (hedonistiseen) ruokavalioon). Saadaksemme lisätietoja tästä aiheesta, tutkimme kasvatuslämpötilan vaikutusta edellä mainittuihin aineenvaihduntaparametreihin normaalipainoisilla aikuisilla uroshiirillä ja ruokavalion aiheuttaman lihavuuden (DIO) uroshiirillä, joilla oli 45 % runsasrasvainen ruokavalio. Hiiriä pidettiin 22, 25, 27,5 tai 30 °C:ssa vähintään kolmen viikon ajan. Alle 22 °C:n lämpötiloja ei ole tutkittu, koska tavanomaiset eläinsuojat ovat harvoin huoneenlämpötilan alapuolella. Havaitsimme, että normaalipainoiset ja yksiympyräiset DIO-hiiret reagoivat samalla tavalla aitauksen lämpötilan muutoksiin energiankulutuksen (EE) suhteen ja aitauksen olosuhteista riippumatta (suojan/pesämateriaalin kanssa tai ilman). Vaikka normaalipainoiset hiiret säätivät ravinnonsaantiaan EE:n mukaan, DIO-hiirten ravinnonsaanti oli pitkälti riippumaton EE:stä, minkä seurauksena hiiret lihoivat enemmän. Painotietojen mukaan plasman lipidien ja ketoaineiden pitoisuudet osoittivat, että DIO-hiirillä oli 30 °C:ssa positiivisempi energiatase kuin hiirillä 22 °C:ssa. Normaalipainoisten ja DIO-hiirten energiansaannin ja EE:n tasapainon erojen taustalla olevat syyt vaativat lisätutkimuksia, mutta ne voivat liittyä DIO-hiirten patofysiologisiin muutoksiin ja nautintovalinnan vaikutukseen lihavan ruokavalion seurauksena.
EE kasvoi lineaarisesti 30 °C:sta 22 °C:seen ja oli noin 30 % korkeampi 22 °C:ssa verrattuna 30 °C:seen (kuva 1a, b). Hengitysvaihtonopeus (RER) oli riippumaton lämpötilasta (kuva 1c, d). Ruoan saanti oli yhdenmukainen EE-dynamiikan kanssa ja lisääntyi lämpötilan laskiessa (myös ~30 % korkeampi 22 °C:ssa verrattuna 30 °C:seen (kuva 1e, f). Veden saanti. Määrä ja aktiivisuustaso eivät riipuneet lämpötilasta (kuva 1g).
Uroshiiriä (C57BL/6J, 20 viikon ikäisiä, yksittäiskasvatukset, n=7) pidettiin aineenvaihduntahäkeissä 22 °C:ssa viikon ajan ennen tutkimuksen alkua. Kaksi päivää taustatietojen keräämisen jälkeen lämpötilaa nostettiin 2 °C:n välein klo 06:00 päivässä (valoisan vaiheen alussa). Tiedot esitetään keskiarvona ± keskiarvon keskivirhe, ja pimeä vaihe (18:00–06:00) on esitetty harmaalla laatikolla. a Energiankulutus (kcal/h), b Kokonaisenergiankulutus eri lämpötiloissa (kcal/24 h), c Hengitysvaihtonopeus (VCO2/VO2: 0,7–1,0), d Keskimääräinen RER valoisassa ja pimeässä vaiheessa (VCO2/VO2) (nolla-arvoksi määritellään 0,7). e kumulatiivinen ravinnonsaanti (g), f 24 tunnin kokonaisravinnonsaanti, g 24 tunnin kokonaisvedensaanti (ml), h 24 tunnin kokonaisvedensaanti, i kumulatiivinen aktiivisuustaso (m) ja j kokonaisaktiivisuustaso (m/24h). Hiiriä pidettiin ilmoitetussa lämpötilassa 48 tuntia. 24, 26, 28 ja 30 °C:n tiedot viittaavat kunkin syklin viimeisiin 24 tuntiin. Hiiret pysyivät ruokittuina koko tutkimuksen ajan. Tilastollista merkitsevyyttä testattiin toistuvilla yksisuuntaisella ANOVA-mittauksilla, joita seurasi Tukeyn monivertailutesti. Asteriskit osoittavat merkitsevyyden alkuarvolle 22 °C, varjostus osoittaa merkitsevyyden muiden ryhmien välillä, kuten on esitetty. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001. *P < 0,05，**P < 0,01，**P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05，**P < 0,01，**P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001.Keskiarvot laskettiin koko koejaksolle (0–192 tuntia). n = 7.
Kuten normaalipainoisten hiirien tapauksessa, EE kasvoi lineaarisesti lämpötilan laskiessa, ja tässäkin tapauksessa EE oli noin 30 % korkeampi 22 °C:ssa verrattuna 30 °C:seen (kuva 2a, b). RER ei muuttunut eri lämpötiloissa (kuva 2c, d). Toisin kuin normaalipainoisilla hiirillä, ravinnon saanti ei ollut yhdenmukainen EE:n kanssa huoneenlämmön funktiona. Ravinnon saanti, veden saanti ja aktiivisuustaso olivat riippumattomia lämpötilasta (kuva 2e–j).
Urospuolisia DIO-hiiriä (C57BL/6J, 20 viikkoa) pidettiin yksittäin aineenvaihduntahäkeissä 22 °C:ssa viikon ajan ennen tutkimuksen alkua. Hiiret voivat käyttää 45 % HFD:tä vapaasti. Kahden päivän totuttelun jälkeen kerättiin lähtötiedot. Tämän jälkeen lämpötilaa nostettiin 2 °C:n välein joka toinen päivä klo 06:00 (valoisan vaiheen alussa). Tiedot esitetään keskiarvona ± keskiarvon keskivirhe, ja pimeä vaihe (18:00–06:00) on esitetty harmaalla laatikolla. a Energiankulutus (kcal/h), b Kokonaisenergiankulutus eri lämpötiloissa (kcal/24 h), c Hengitysvaihtonopeus (VCO2/VO2: 0,7–1,0), d Keskimääräinen RER valoisassa ja pimeässä vaiheessa (VCO2/VO2) (nolla-arvo on määritelty arvossa 0,7). e kumulatiivinen ravinnonsaanti (g), f 24 tunnin kokonaisravinnonsaanti, g 24 tunnin kokonaisvedensaanti (ml), h 24 tunnin kokonaisvedensaanti, i kumulatiivinen aktiivisuustaso (m) ja j kokonaisaktiivisuustaso (m/24h). Hiiriä pidettiin ilmoitetussa lämpötilassa 48 tuntia. 24, 26, 28 ja 30 °C:n tiedot viittaavat kunkin syklin viimeisiin 24 tuntiin. Hiiriä pidettiin 45 %:n HFD-lämpötilassa tutkimuksen loppuun asti. Tilastollista merkitsevyyttä testattiin toistuvilla yksisuuntaisella ANOVA-mittauksilla, joita seurasi Tukeyn monivertailutesti. Asteriskit osoittavat merkitsevyyttä alkuarvolle 22 °C, varjostus osoittaa merkitsevyyttä muiden ryhmien välillä, kuten on esitetty. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0,05, ***P<0,001, ****P<0,0001. *P < 0,05，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0,05, ***P<0,001, ****P<0,0001.Keskiarvot laskettiin koko koejaksolle (0–192 tuntia). n = 7.
Toisessa koesarjassa tutkimme ympäristön lämpötilan vaikutusta samoihin parametreihin, mutta tällä kertaa eri hiiriryhmien välillä, joita pidettiin jatkuvasti tietyssä lämpötilassa. Hiiret jaettiin neljään ryhmään, jotta minimoitiin tilastolliset muutokset painon, rasvaprosentin ja normaalin painon keskiarvossa ja keskihajonnassa (kuva 3a–c). Seitsemän päivän totuttelun jälkeen kirjattiin 4,5 päivää EE:tä. Ympäristön lämpötila vaikuttaa merkittävästi EE:hen sekä päivänvalossa että yöllä (kuva 3d), ja se kasvaa lineaarisesti lämpötilan laskiessa 27,5 °C:sta 22 °C:een (kuva 3e). Verrattuna muihin ryhmiin 25 °C:n ryhmän RER oli jonkin verran pienentynyt, eikä jäljellä olevien ryhmien välillä ollut eroja (kuva 3f, g). EE-kuvion a mukaisesti ruoan saanti kasvoi noin 30 % 22 °C:ssa verrattuna 30 °C:seen (kuva 3h, i). Vedenkulutus ja aktiivisuustasot eivät eronneet merkittävästi ryhmien välillä (kuva 3j, k). Eri lämpötiloille altistuminen jopa 33 päivän ajan ei johtanut ryhmien välisiin eroihin ruumiinpainossa, vähärasvaisessa massassa ja rasvamassassa (kuva 3n-s), mutta se johti vähärasvaisen massan noin 15 %:n laskuun itse raportoituihin pisteisiin verrattuna (kuva 3n-s). 3b, r, c)) ja rasvamassa kasvoi yli kaksinkertaisesti (~1 grammasta 2–3 grammaan, kuva 3c, t, c). Valitettavasti 30 °C:n kaapissa on kalibrointivirheitä, eikä se pysty tarjoamaan tarkkoja EE- ja RER-tietoja.
- Paino (a), vähärasvainen massa (b) ja rasvamassa (c) 8 päivän kuluttua (yksi päivä ennen siirtoa SABLE-järjestelmään). d Energiankulutus (kcal/h). e Keskimääräinen energiankulutus (0–108 tuntia) eri lämpötiloissa (kcal/24 tuntia). f Hengitysvaihtosuhde (RER) (VCO2/VO2). g Keskimääräinen RER (VCO2/VO2). h Kokonaisravinnon saanti (g). i Keskimääräinen ravinnon saanti (g/24 tuntia). j Kokonaisvedenkulutus (ml). k Keskimääräinen vedenkulutus (ml/24 h). l Kumulatiivinen aktiivisuustaso (m). m Keskimääräinen aktiivisuustaso (m/24 h). n paino 18. päivänä, o painonmuutos (8. päivästä 18. päivään), p vähärasvainen massa 18. päivänä, q vähärasvaisen massan muutos (8. päivästä 18. päivään), r rasvamassa päivänä 18 ja rasvamassan muutos (8. päivästä 18. päivään). Toistettujen mittausten tilastollista merkitsevyyttä testattiin Oneway-ANOVA:lla ja sen jälkeen Tukeyn monivertailutestillä. *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P<0,05, **P<0,01, ***P<0,001, ****P<0,0001. *P < 0,05，**P < 0,01，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05，**P < 0,01，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05, **P < 0,01, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P<0,05, **P<0,01, ***P<0,001, ****P<0,0001.Tiedot esitetään keskiarvona + keskiarvon standardivirhe. Pimeä vaihe (klo 18.00–06.00) on esitetty harmailla laatikoilla. Histogrammien pisteet edustavat yksittäisiä hiiriä. Keskiarvot laskettiin koko koejaksolle (0–108 tuntia). n = 7.
Hiiret yhdistettiin lähtötilanteessa painon, vähärasvaisen massan ja rasvamassan suhteen (kuvat 4a–c), ja niitä pidettiin 22, 25, 27,5 ja 30 °C:ssa kuten normaalipainoisilla hiirillä tehdyissä tutkimuksissa. Hiiriryhmiä verrattaessa EE:n ja lämpötilan välinen suhde osoitti samanlaista lineaarista suhdetta lämpötilaan ajan kuluessa samoilla hiirillä. Siten 22 °C:ssa pidetyt hiiret kuluttivat noin 30 % enemmän energiaa kuin 30 °C:ssa pidetyt hiiret (kuva 4d, e). Eläimiin kohdistuvia vaikutuksia tutkittaessa lämpötila ei aina vaikuttanut reaaliaikaiseen energiankulutukseen (kuva 4f, g). Lämpötila ei vaikuttanut merkittävästi ruoan saantiin, veden saantiin ja aktiivisuuteen (kuvat 4h–m). 33 päivän kasvatuksen jälkeen 30 °C:ssa pidetyillä hiirillä oli merkittävästi suurempi paino kuin 22 °C:ssa pidetyillä hiirillä (kuva 4n). Lähtötasoonsa verrattuna 30 °C:ssa kasvatetuilla hiirillä oli merkittävästi suurempi paino kuin 22 °C:ssa kasvatetuilla hiirillä (keskiarvo ± keskiarvon standardivirhe: kuva 4o). Suhteellisesti suurempi painonnousu johtui rasvamassan kasvusta (kuva 4p, q) pikemminkin kuin vähärasvaisen massan kasvusta (kuva 4r, s). Yhdenmukaisesti 30 °C:ssa havaitun alhaisemman EE-arvon kanssa useiden BAT-geenien, jotka lisäävät BAT-toimintaa/aktiivisuutta, ilmentyminen väheni 30 °C:ssa verrattuna 22 °C:seen: Adra1a, Adrb3 ja Prdm16. Muihin keskeisiin geeneihin, jotka myös lisäävät BAT-toimintaa/aktiivisuutta, ilmentyminen ei vaikuttanut: Sema3a (neuriittien kasvun säätely), Tfam (mitokondrioiden biogeneesi), Adrb1, Adra2a, Pck1 (glukoneogeneesi) ja Cpt1a. Yllättäen Ucp1 ja Vegf-a, jotka liittyvät lisääntyneeseen termogeeniseen aktiivisuuteen, eivät vähentyneet 30 °C:n ryhmässä. Itse asiassa Ucp1-tasot kolmella hiirellä olivat korkeammat kuin 22 °C:n ryhmässä, ja Vegf-a ja Adrb2 olivat merkittävästi koholla. Verrattuna 22 °C:n ryhmään, 25 °C:ssa ja 27,5 °C:ssa pidetyillä hiirillä ei havaittu muutosta (lisäkuva 1).
- Paino (a), vähärasvainen massa (b) ja rasvamassa (c) 9 päivän kuluttua (yksi päivä ennen siirtoa SABLE-järjestelmään). d Energiankulutus (EE, kcal/h). e Keskimääräinen energiankulutus (0–96 tuntia) eri lämpötiloissa (kcal/24 tuntia). f Hengitysvaihtosuhde (RER, VCO2/VO2). g Keskimääräinen RER (VCO2/VO2). h Kokonaisravinnon saanti (g). i Keskimääräinen ravinnon saanti (g/24 tuntia). j Kokonaisvedenkulutus (ml). k Keskimääräinen vedenkulutus (ml/24 h). l Kumulatiivinen aktiivisuustaso (m). m Keskimääräinen aktiivisuustaso (m/24 h). n Paino päivänä 23 (g), o Painonmuutos, p Vähärasvainen massa, q Vähärasvaisen massan muutos (g) päivänä 23 verrattuna päivään 9, Rasvamassan muutos (g) päivänä 23, rasvamassa (g) verrattuna päivään 8, päivänä 23 verrattuna päivään -8. Toistettujen mittausten tilastollista merkitsevyyttä testattiin Oneway-ANOVA:lla ja sen jälkeen Tukeyn monivertailutestillä. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *P < 0,05, ***P < 0,001, ****P < 0,0001. *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0,05, ***P<0,001, ****P<0,0001. *P < 0,05，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *P < 0,05，***P < 0,001，****P < 0,0001。 *Р<0,05, ***Р<0,001, ****Р<0,0001. *P<0,05, ***P<0,001, ****P<0,0001.Tiedot esitetään keskiarvona + keskiarvon standardivirhe. Pimeä vaihe (klo 18.00–06.00) on esitetty harmailla laatikoilla. Histogrammien pisteet edustavat yksittäisiä hiiriä. Keskiarvot laskettiin koko koejaksolle (0–96 tuntia). n = 7.
Kuten ihmiset, hiiret luovat usein mikroympäristöjä vähentääkseen lämmönhukkaa ympäristöön. Määrittääksemme tämän ympäristön merkityksen energiankulutukselle (EE) arvioimme energiankulutusta 22, 25, 27,5 ja 30 °C:ssa, nahkasuojien ja pesämateriaalin kanssa tai ilman. 22 °C:ssa standardinahkojen lisääminen vähentää energiankulutusta noin 4 %. Myöhemmin lisätty pesämateriaali vähensi energiankulutusta 3–4 % (kuva 5a, b). Merkittäviä muutoksia RER:ssä, ravinnonsaannissa, vedensaannissa tai aktiivisuustasoissa ei havaittu talojen tai nahkojen ja vuodevaatteiden lisäämisen yhteydessä (kuva 5i–p). Nahan ja pesämateriaalin lisääminen vähensi myös merkittävästi energiankulutusta 25 ja 30 °C:ssa, mutta vasteet olivat kvantitatiivisesti pienempiä. 27,5 °C:ssa ei havaittu eroa. Näissä kokeissa energiankulutus laski lämpötilan noustessa, tässä tapauksessa noin 57 % alhaisemmaksi kuin energiankulutus 30 °C:ssa verrattuna 22 °C:een (kuva 5c–h). Sama analyysi suoritettiin vain valovaiheelle, jossa EE oli lähempänä perusaineenvaihdunnan nopeutta, koska tässä tapauksessa hiiret lepäsivät enimmäkseen iholla, mikä johti vertailukelpoisiin vaikutuskokoihin eri lämpötiloissa (lisäkuva 2a – h).
Tiedot hiiristä, jotka olivat suojassa ja joilla oli pesämateriaalia (tummansininen), kodista mutta ilman pesämateriaalia (vaaleansininen) ja kodista ja pesämateriaalista (oranssi). Energiankulutus (EE, kcal/h) huoneissa a, c, e ja g lämpötiloissa 22, 25, 27,5 ja 30 °C, b, d, f ja h tarkoittavat EE:tä (kcal/h). ip Tiedot hiiristä, joita oli pidetty 22 °C:ssa: i hengitystiheys (RER, VCO2/VO2), j keskimääräinen RER (VCO2/VO2), k kumulatiivinen ravinnonsaanti (g), l keskimääräinen ravinnonsaanti (g/24 h), m veden kokonaissaanti (ml), n keskimääräinen vedensaanti AUC (ml/24 h), o kokonaisaktiivisuus (m), p keskimääräinen aktiivisuustaso (m/24 h). Tiedot esitetään keskiarvona + keskiarvon keskivirhe, pimeä vaihe (18:00-06:00 h) on esitetty harmailla laatikoilla. Histogrammien pisteet edustavat yksittäisiä hiiriä. Toistettujen mittausten tilastollista merkitsevyyttä testattiin Oneway-ANOVA:lla ja sen jälkeen Tukeyn monivertailutestillä. *P < 0,05, **P < 0,01. *P < 0,05, **P < 0,01. *P<0,05, **P<0,01. *P<0,05, **P<0,01. *P < 0,05, **P < 0,01. *P < 0,05, **P < 0,01. *P<0,05, **P<0,01. *P<0,05, **P<0,01.Keskiarvot laskettiin koko koejaksolle (0–72 tuntia). n = 7.
Normaalipainoisilla hiirillä (2–3 tuntia paastoa) eri lämpötiloissa kasvattaminen ei johtanut merkittäviin eroihin plasman TG-, 3-HB-, kolesteroli-, ALAT- ja ASAT-pitoisuuksissa, mutta HDL-pitoisuus lämpötilan funktiona erosi merkittävästi. Kuva 6a–e). Leptiinin, insuliinin, C-peptidin ja glukagonin paastopitoisuudet plasmassa eivät myöskään eronneet ryhmien välillä (kuvat 6g–j). Glukoosinsietokokeen päivänä (31 päivän kuluttua eri lämpötiloissa) lähtötason verensokeritaso (5–6 tuntia paastoa) oli noin 6,5 mM, eikä ryhmien välillä ollut eroa. Suun kautta otettu glukoosi lisäsi verensokeripitoisuuksia merkittävästi kaikissa ryhmissä, mutta sekä huippupitoisuus että käyrien alle jäävä pinta-ala (iAUC) (15–120 min) olivat alhaisemmat 30 °C:ssa pidetyssä hiiriryhmässä (yksittäiset aikapisteet: P < 0,05–P < 0,0001, kuva 6k, l) verrattuna 22, 25 ja 27,5 °C:ssa pidettyihin hiiriin (jotka eivät eronneet toisistaan). Suun kautta otettu glukoosi lisäsi verensokeripitoisuuksia merkittävästi kaikissa ryhmissä, mutta sekä huippupitoisuus että käyrien alle jäävä pinta-ala (iAUC) (15–120 min) olivat alhaisemmat 30 °C:ssa pidetyssä hiiriryhmässä (yksittäiset aikapisteet: P < 0,05–P < 0,0001, kuva 6k, l) verrattuna 22, 25 ja 27,5 °C:ssa pidettyihin hiiriin (jotka eivät eronneet toisistaan). Пероральное введение глюкозы значительно повышало концентрацию глюкозы в крови во всех группаях, нопика концентрация, так и площадь приращения под кривыми (iAUC) (15–120 мин) были ниже в группе мышерищ, сошящях, 3 (отдельные временные точки: P < 0,05–P < 0,0001, рис. 6k, l) по сравнению с мышами, содержащимися 7 при, 522, 22. (которые не различались между собой). Glukoosin oraalinen anto lisäsi merkittävästi verensokeripitoisuuksia kaikissa ryhmissä, mutta sekä huippupitoisuus että käyrien alle jäävä pinta-ala (iAUC) (15–120 min) olivat alhaisemmat 30 °C:ssa pidetyssä hiiriryhmässä (eri aikapisteet: P < 0,05–P < 0,0001, kuva 6k, l) verrattuna 22, 25 ja 27,5 °C:ssa pidettyihin hiiriin (jotka eivät eronneet toisistaan).口服葡萄糖的给药显着增加了所有组的血糖浓度，但在C饲养的小鼠组中，峰值浓度和曲线下增加面积(iAUC) (15-120 分钟) 均较低（均较低（和0,05–P < 0,0001, 图6k, l) 与饲养在22, 25 和27,5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比.口服 葡萄糖 的 给 药 显着 了 所有组 的 血糖 浓度 但 在 在 伨 在 30 ° C 饲养浓度 和 曲线 下 增加 面积 面积 (IAUC) (15-120 分钟) 均 较 低 各 个 点 点 点 点P 0,0001，图6k，l）与饲养在22、25和27.5°C 的小鼠（彼此之间没有差异）相比Glukoosin oraalinen anto lisäsi merkittävästi verensokeripitoisuuksia kaikissa ryhmissä, mutta sekä huippupitoisuus että käyrän alla oleva pinta-ala (iAUC) (15–120 min) olivat alhaisemmat 30 °C:ssa ruokitulla hiiriryhmällä (kaikki aikapisteet).: P < 0,05 – P < 0,0001, рис. P < 0,05–P < 0,0001, kuva.6l, l) verrattuna hiiriin, joita pidettiin 22, 25 ja 27,5 °C:ssa (ei eroa toisistaan).
Plasman TG-, 3-HB-, kolesteroli-, HDL-, ALT-, AST-, FFA-, glyseroli-, leptiini-, insuliini-, C-peptidi- ja glukagonipitoisuudet aikuisilla uros-DIO(al)-hiirillä 33 päivän ruokinnan jälkeen ilmoitetussa lämpötilassa. Hiiriä ei ruokittu 2–3 tuntia ennen verinäytteenottoa. Poikkeuksena oli oraalinen glukoosirasituskoe, joka tehtiin kaksi päivää ennen tutkimuksen loppua hiirille, joita oli paastottu 5–6 tuntia ja pidetty sopivassa lämpötilassa 31 päivän ajan. Hiirille annettiin 2 g/kg ruumiinpainoa. Käyrän alla oleva pinta-ala (L) ilmaistaan lisätietoina (iAUC). Tiedot esitetään keskiarvona ± SEM. Pisteet edustavat yksittäisiä näytteitä. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7.
DIO-hiirillä (myös paastossa 2–3 tuntia) plasman kolesteroli-, HDL-, ALAT-, ASAT- ja vapaan rasvan pitoisuudet eivät eronneet ryhmien välillä. Sekä TG että glyseroli olivat merkittävästi koholla 30 °C:n ryhmässä verrattuna 22 °C:n ryhmään (kuvat 7a–h). Sitä vastoin 3-GB oli noin 25 % alhaisempi 30 °C:ssa verrattuna 22 °C:seen (kuva 7b). Vaikka 22 °C:ssa pidetyillä hiirillä oli kokonaisuudessaan positiivinen energiatase, kuten painonnousu viittaa, plasman TG-, glyseroli- ja 3-HB-pitoisuuksien erot viittaavat siihen, että näytteenottohetkellä 22 °C:ssa hiiret olivat suhteellisesti energeettisesti negatiivisemmassa tilassa. Tämän mukaisesti uutettavan glyserolin ja TG:n, mutta ei glykogeenin ja kolesterolin, maksapitoisuudet olivat korkeammat 30 °C:n ryhmässä (lisäkuva 3a–d). Selvittääksemme, johtuvatko lämpötilasta riippuvat lipolyysin erot (mitattuna plasman TG:llä ja glyserolilla) lisäkiveksen tai nivuskudoksen sisäisistä muutoksista, otimme tutkimuksen lopussa rasvakudosta näistä varastoista ja määritimme vapaiden rasvahappojen määrän ex vivo. ja glyserolin vapautumisen. Kaikissa koeryhmissä lisäkiveksen ja nivuskudoksen varastoista otetut rasvakudosnäytteet osoittivat vähintään kaksinkertaisen glyserolin ja vapaan rasvahapon tuotannon lisääntymisen vasteena isoproterenolistimulaatioon (lisäkuva 4a–d). Kuoren lämpötilalla ei kuitenkaan havaittu vaikutusta basaaliseen tai isoproterenolin stimuloimaan lipolyysiin. Yhdenmukaisesti suuremman painon ja rasvamassan kanssa plasman leptiinitasot olivat merkitsevästi korkeammat 30 °C:n ryhmässä kuin 22 °C:n ryhmässä (kuva 7i). Sitä vastoin plasman insuliini- ja C-peptiditasot eivät eronneet lämpötilaryhmien välillä (kuva 7k, k), mutta plasman glukagoni osoitti riippuvuutta lämpötilasta, mutta tässä tapauksessa lähes 22 °C vastakkaisessa ryhmässä oli kaksinkertainen verrattuna 30 °C:een. Ryhmä C (kuva 7l). FGF21 ei eronnut eri lämpötilaryhmien välillä (kuva 7m). OGTT-päivänä verensokerin lähtötaso oli noin 10 mM, eikä se eronnut eri lämpötiloissa pidettyjen hiirten välillä (kuva 7n). Glukoosin oraalinen anto nosti verensokeritasoja ja saavutti huippunsa kaikissa ryhmissä noin 18 mM:n pitoisuudessa 15 minuuttia annostelun jälkeen. iAUC-arvoissa (15–120 min) ja pitoisuuksissa eri ajankohtina annostelun jälkeen (15, 30, 60, 90 ja 120 min) ei ollut merkittäviä eroja (kuva 7n, o).
TG:n, 3-HB:n, kolesterolin, HDL:n, ALT:n, AST:n, FFA:n, glyserolin, leptiinin, insuliinin, C-peptidin, glukagonin ja FGF21:n plasmapitoisuudet havaittiin aikuisilla uros-DIO (ao) -hiirillä 33 päivän ruokinnan jälkeen. Hiiriä ei ruokittu 2–3 tuntia ennen verinäytteenottoa. Oraalinen glukoosirasituskoe oli poikkeus, koska se suoritettiin annoksella 2 g/kg ruumiinpainoa kaksi päivää ennen tutkimuksen loppua hiirille, joita pidettiin paastossa 5–6 tuntia ja pidettiin sopivassa lämpötilassa 31 päivän ajan. Käyrän alla oleva pinta-ala (o) on esitetty inkrementaalisena datana (iAUC). Tiedot esitetään keskiarvona ± SEM. Pisteet edustavat yksittäisiä näytteitä. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P < 0,05, **P < 0,01, **P < 0,001, ****P < 0,0001, n = 7. *P<0,05, **P<0,01, **P<0,001, ****P<0,0001, n=7.
Jyrsijädatan siirrettävyys ihmisille on monimutkainen kysymys, jolla on keskeinen rooli havaintojen tärkeyden tulkinnassa fysiologisen ja farmakologisen tutkimuksen yhteydessä. Taloudellisista syistä ja tutkimuksen helpottamiseksi hiiriä pidetään usein huoneenlämmössä, joka on niiden termoneutraalin alueen alapuolella, mikä johtaa erilaisten kompensoivien fysiologisten järjestelmien aktivoitumiseen, mikä lisää aineenvaihduntaa ja mahdollisesti heikentää siirrettävyyttä9. Hiirien altistuminen kylmälle voi siis tehdä hiiristä vastustuskykyisiä ruokavalion aiheuttamalle lihavuudelle ja estää hyperglykemiaa streptotsotosiinilla käsitellyillä rotilla lisääntyneen insuliinista riippumattoman glukoosikuljetuksen vuoksi. Ei kuitenkaan ole selvää, missä määrin pitkäaikainen altistuminen eri lämpötiloille (huoneen lämpötilasta termoneutraaliin) vaikuttaa normaalipainoisten hiirten (ruoalla) ja dioksiinipohjaisten hiirten (suurfraktiodieetillä) erilaiseen energiatasapainoon ja aineenvaihduntaparametreihin, sekä missä määrin ne pystyivät tasapainottamaan EE:n lisääntymistä ruoan saannin lisääntymisen kanssa. Tässä artikkelissa esitetty tutkimus pyrkii selventämään tätä aihetta.
Osoitamme, että normaalipainoisilla aikuisilla hiirillä ja uros-DIO-hiirillä EE on kääntäen verrannollinen huoneenlämpötilaan 22–30 °C:n välillä. Siten EE 22 °C:ssa oli noin 30 % korkeampi kuin 30 °C:ssa molemmissa hiirimalleissa. Tärkeä ero normaalipainoisten hiirten ja DIO-hiirten välillä on kuitenkin se, että vaikka normaalipainoiset hiiret vastasivat EE:tä alemmissa lämpötiloissa säätämällä ravinnonsaantia vastaavasti, DIO-hiirten ravinnonsaanti vaihteli eri tasoilla. Tutkimuslämpötilat olivat samankaltaisia. Kuukauden kuluttua 30 °C:ssa pidetyt DIO-hiiret lihoivat ja rasvamassaa enemmän kuin 22 °C:ssa pidetyt hiiret, kun taas samassa lämpötilassa ja saman ajanjakson ajan pidetyillä normaaleilla ihmisillä ei havaittu kuumetta. Riippuvainen ero ruumiinpainossa. Verrattuna lähellä termoneutraalia lämpötilaa tai huoneenlämpöä oleviin lämpötiloihin, kasvu huoneenlämmössä johti siihen, että DIO- tai normaalipainoiset hiiret lihoivat suhteellisesti vähemmän runsasrasvaisella ruokavaliolla, mutta eivät normaalipainoisella ruokavaliolla olevat hiiret. Muut tutkimukset17,18,19,20,21 tukevat tätä, mutta eivät kaikki22,23.
Lämpöhäviötä vähentävän mikroympäristön luomisen on oletettu siirtävän lämpöneutraaliutta vasemmalle8, 12. Tutkimuksessamme sekä pesämateriaalin lisääminen että piilottaminen vähensivät lämpöenergiaa (EE), mutta eivät johtaneet lämpöneutraaliuteen 28 °C:seen asti. Näin ollen tietomme eivät tue sitä, että yksipolvisten aikuisten hiirten lämpöneutraaliuden alimman pisteen, olipa kyseessä ympäristöllisesti rikastettu rakennus tai ei, pitäisi olla 26–28 °C, kuten on esitetty8,12, mutta se tukee muita tutkimuksia, jotka osoittavat lämpöneutraalisuuden. 30 °C:n lämpötiloja matalan pisteen hiirillä7, 10, 24. Asiaa mutkistaa se, että hiirten lämpöneutraaliuspisteen on osoitettu olevan erilainen päivän aikana, koska se on matalampi lepovaiheen (valoisan vaiheen) aikana, mahdollisesti johtuen alhaisemmasta kalorien tuotannosta aktiivisuuden ja ruokavalion indusoiman termogeneesin seurauksena. Siten valoisassa vaiheessa lämpöneutraaliuden alin piste osoittautuu ~29 °C:ksi ja pimeässä vaiheessa ~33 °C:ksi25.
Ympäristön lämpötilan ja kokonaisenergiankulutuksen välinen suhde määräytyy viime kädessä lämmönhukkauksen perusteella. Tässä yhteydessä pinta-alan suhde tilavuuteen on tärkeä lämpöherkkyyden määräävä tekijä, joka vaikuttaa sekä lämmönhukkaukseen (pinta-ala) että lämmöntuotantoon (tilavuus). Pinta-alan lisäksi lämmönsiirtoon vaikuttaa myös eristys (lämmönsiirtonopeus). Ihmisillä rasvamassa voi vähentää lämpöhäviötä luomalla eristävän esteen kehon rungon ympärille, ja on ehdotettu, että rasvamassa on tärkeä myös hiirien lämmöneristykselle, sillä se alentaa termoneutraalipistettä ja vähentää lämpötilaherkkyyttä termisen neutraalipisteen alapuolella (käyrän kulmakerroin). Ympäristön lämpötila verrattuna EE:hen)12. Tutkimuksemme ei ollut suunniteltu arvioimaan suoraan tätä oletettua suhdetta, koska kehonkoostumustiedot kerättiin 9 päivää ennen energiankulutustietojen keräämistä ja koska rasvamassa ei ollut vakaa koko tutkimuksen ajan. Koska normaalipainoisilla ja DIO-hiirillä on kuitenkin 30 % alhaisempi EE 30 °C:ssa kuin 22 °C:ssa, vaikka rasvamassassa on vähintään 5-kertainen ero, tietomme eivät tue sitä, että lihavuuden pitäisi tarjota peruseristystekijä, ainakaan tutkitulla lämpötila-alueella. Tämä on linjassa muiden, tätä asiaa paremmin tutkivien tutkimusten kanssa4,24. Näissä tutkimuksissa lihavuuden eristävä vaikutus oli pieni, mutta turkin havaittiin muodostavan 30–50 % kokonaislämmöneristyksestä4,24. Kuolleilla hiirillä lämmönjohtavuus kuitenkin kasvoi noin 450 % heti kuoleman jälkeen, mikä viittaa siihen, että turkin eristävä vaikutus on välttämätön fysiologisten mekanismien, mukaan lukien vasokonstriktion, toimimiselle. Hiirien ja ihmisten turkisten lajierojen lisäksi lihavuuden heikkoon eristävään vaikutukseen hiirillä voivat vaikuttaa myös seuraavat seikat: Ihmisen rasvamassan eristävä tekijä välittyy pääasiassa ihonalaisen rasvamassan (paksuuden) kautta26,27. Jyrsijöillä tyypillisesti alle 20 % eläinten kokonaisrasvasta28. Lisäksi kokonaisrasvamassa ei välttämättä ole edes optimaalinen mitta yksilön lämmöneristykselle, koska on väitetty, että parantunut lämmöneristys kompensoituu väistämättömällä pinta-alan kasvulla (ja siten lisääntyneellä lämmönhukalla) rasvamassan kasvaessa.
Normaalipainoisilla hiirillä plasman TG-, 3-HB-, kolesteroli-, HDL-, ALAT- ja ASAT-pitoisuudet paastotilassa eivät muuttuneet eri lämpötiloissa lähes viiden viikon ajan, luultavasti siksi, että hiiret olivat samassa energiatasapainon tilassa. Ne olivat painoltaan ja kehonkoostumukseltaan samat kuin tutkimuksen lopussa. Rasvamassan samankaltaisuuden mukaisesti plasman leptiinitasoissa eikä paastoinsuliinissa, C-peptidissä ja glukagonin pitoisuuksissa ollut eroja. DIO-hiirillä havaittiin enemmän signaaleja. Vaikka 22 °C:ssa kasvaneilla hiirillä ei myöskään ollut kokonaisuudessaan negatiivista energiatasapainoa tässä tilassa (painon noustessa), tutkimuksen lopussa niillä oli suhteellisesti enemmän energiavajetta verrattuna 30 °C:ssa kasvatettuihin hiiriin olosuhteissa, joissa elimistön ketonituotanto oli korkea (3-GB) ja plasman glyserolin ja TG:n pitoisuudet laskivat. Lämpötilariippuvaiset lipolyysin erot eivät kuitenkaan näytä johtuvan lisäkiveksen tai nivusalueen rasvan sisäisistä muutoksista, kuten adipohormoniin reagoivan lipaasin ilmentymisen muutoksista, koska näistä varastoista uutetusta rasvasta vapautuvat vapaat rasvahapot ja glyseroli ovat välillä 20 °C ja 30 °C. Lämpötilaryhmät ovat samankaltaisia. Vaikka emme tutkineet sympaattista hermostoa tässä tutkimuksessa, muut ovat havainneet, että se (sykkeen ja keskimääräisen valtimopaineen perusteella) liittyy lineaarisesti ympäristön lämpötilaan hiirillä ja on suunnilleen alhaisempi 30 °C:ssa kuin 22 °C:ssa. 20 % C. Siten lämpötilariippuvaisilla sympaattisen hermoston eroilla voi olla merkitystä lipolyysissä tutkimuksessamme, mutta koska sympaattisen hermoston lisääntyminen stimuloi eikä estä lipolyysiä, muut mekanismit voivat kumota tämän laskun viljellyillä hiirillä. Mahdollinen rooli kehon rasvan hajoamisessa. Huoneenlämpö. Lisäksi osa sympaattisen hermoston stimuloivasta vaikutuksesta lipolyysiin välittyy epäsuorasti insuliinin erityksen voimakkaan eston kautta, mikä korostaa insuliinin keskeyttämän lisäravinteen vaikutusta lipolyysiin30. Tutkimuksessamme paastoplasman insuliini ja C-peptidin sympaattinen hermosto eri lämpötiloissa eivät kuitenkaan riittäneet muuttamaan lipolyysiä. Sen sijaan havaitsimme, että energiatilan erot olivat todennäköisimmin näiden erojen pääasiallinen aiheuttaja DIO-hiirillä. EE:n parempaan ravinnonsaantiin johtavien taustalla olevien syiden selvittäminen normaalipainoisilla hiirillä vaatii lisätutkimuksia. Yleisesti ottaen ravinnonsaantia kuitenkin säätelevät homeostaattiset ja hedonistiset vihjeet31,32,33. Vaikka siitä, kumpi näistä kahdesta signaalista on määrällisesti tärkeämpi,31,32,33 on keskustelua, on hyvin tunnettua, että runsasrasvaisten ruokien pitkäaikainen kulutus johtaa enemmän nautintoon perustuvaan syömiskäyttäytymiseen, joka ei jossain määrin liity homeostaasiin. – säädelty ravinnonsaanti34,35,36. Siksi 45 %:n HFD-ravintoaineella käsiteltyjen DIO-hiirten lisääntynyt hedonistinen ruokailukäyttäytyminen voi olla yksi syy siihen, miksi nämä hiiret eivät tasapainottaneet ruoan saantia EE:n kanssa. Mielenkiintoista on, että ruokahalussa ja verensokeria säätelevissä hormoneissa havaittiin eroja myös lämpötilakontrolloiduilla DIO-hiirillä, mutta ei normaalipainoisilla hiirillä. DIO-hiirillä plasman leptiinitasot nousivat lämpötilan mukana ja glukagonipitoisuudet laskivat lämpötilan mukana. On syytä tutkia, missä määrin lämpötila voi suoraan vaikuttaa näihin eroihin, mutta leptiinin tapauksessa suhteellinen negatiivinen energiatasapaino ja siten hiirten pienempi rasvamassa 22 °C:ssa olivat varmasti tärkeässä roolissa, koska rasvamassa ja plasman leptiini korreloivat voimakkaasti37. Glukagonisignaalin tulkinta on kuitenkin hämmentävämpi. Kuten insuliinin kohdalla, sympaattisen hermoston lisääntyminen esti voimakkaasti glukagonin eritystä, mutta korkeimman sympaattisen hermoston ennustettiin olevan 22 °C:n ryhmässä, jolla oli korkeimmat plasman glukagonipitoisuudet. Insuliini on toinen voimakas plasman glukagonin säätelijä, ja insuliiniresistenssi ja tyypin 2 diabetes liittyvät vahvasti paasto- ja aterianjälkeiseen hyperglukagonemiaan 38,39. Tutkimuksemme DIO-hiiret olivat kuitenkin myös insuliiniepäherkkiä, joten tämäkään ei voinut olla tärkein tekijä glukagonisignaloinnin lisääntymisessä 22 °C:n ryhmässä. Maksan rasvapitoisuus liittyy myös positiivisesti plasman glukagonipitoisuuden nousuun, jonka mekanismeihin puolestaan voivat kuulua maksan glukagoniresistenssi, vähentynyt urean tuotanto, lisääntyneet verenkierrossa olevat aminohappopitoisuudet ja lisääntynyt aminohappojen stimuloima glukagonin eritys 40,41,42. Koska glyserolin ja TG:n uutettavissa olevat pitoisuudet eivät kuitenkaan eronneet lämpötilaryhmien välillä tutkimuksessamme, tämäkään ei voinut olla mahdollinen tekijä plasman pitoisuuksien nousussa 22 °C:n ryhmässä. Trijodityroniinilla (T3) on ratkaiseva rooli aineenvaihdunnan kokonaisnopeudessa ja metabolisen puolustuksen käynnistymisessä hypotermiaa vastaan 43,44. Näin ollen plasman T3-pitoisuus, jota mahdollisesti säätelevät keskushermoston välittämät mekanismit,45,46 nousee sekä hiirillä että ihmisillä vähemmän kuin termoneutraaleissa olosuhteissa47, vaikka ihmisillä nousu on pienempi, mikä on alttiimpaa hiirille. Tämä on yhdenmukaista lämmönhukan kanssa ympäristöön. Emme mitanneet plasman T3-pitoisuuksia tässä tutkimuksessa, mutta pitoisuudet ovat saattaneet olla alhaisemmat 30 °C:n ryhmässä, mikä voi selittää tämän ryhmän vaikutuksen plasman glukagonipitoisuuksiin, sillä me (päivitetty kuva 5a) ja muut olemme osoittaneet, että T3 lisää plasman glukagonia annoksesta riippuvalla tavalla. Kilpirauhashormonien on raportoitu indusoivan FGF21:n ilmentymistä maksassa. Kuten glukagonin, myös plasman FGF21-pitoisuudet nousivat plasman T3-pitoisuuksien myötä (lisäkuva 5b ja viite 48), mutta glukagoniin verrattuna lämpötila ei vaikuttanut tutkimuksessamme FGF21:n plasmapitoisuuksiin. Tämän ristiriidan taustalla olevat syyt vaativat lisätutkimuksia, mutta T3-hormonien aiheuttaman FGF21-induktion tulisi tapahtua korkeammilla T3-altistustasoilla verrattuna havaittuun T3-hormonien aiheuttamaan glukagonivasteeseen (lisäkuva 5b).
HFD:n on osoitettu liittyvän voimakkaasti heikentyneeseen glukoosinsietoon ja insuliiniresistenssiin (markkerit) 22 °C:ssa kasvatetuilla hiirillä. HFD:llä ei kuitenkaan ollut yhteyttä heikentyneeseen glukoosinsietoon tai insuliiniresistenssiin, kun niitä kasvatettiin termoneutraalissa ympäristössä (tässä määriteltynä 28 °C:ksi)19. Tutkimuksessamme tätä yhteyttä ei toistettu DIO-hiirillä, mutta normaalipainoiset hiiret, joita pidettiin 30 °C:ssa, paransivat merkittävästi glukoosinsietoa. Tämän eron syy vaatii lisätutkimuksia, mutta siihen voi vaikuttaa se, että tutkimuksemme DIO-hiiret olivat insuliiniresistenttejä, ja niiden plasman C-peptidipitoisuudet paastotilassa ja insuliinipitoisuudet insuliinissa olivat 12–20 kertaa korkeammat kuin normaalipainoisilla hiirillä. ja veressä tyhjän mahan jälkeen. glukoosipitoisuudet olivat noin 10 mM (noin 6 mM normaalipainossa), mikä näyttää jättävän pienen ikkunan mahdollisille hyödyllisille vaikutuksille, joita lämpöneutraaleille olosuhteille altistuminen voi parantaa glukoosinsietoa. Mahdollinen hämmentävä tekijä on, että käytännön syistä OGTT suoritetaan huoneenlämmössä. Näin ollen korkeammissa lämpötiloissa kasvatetut hiiret kokivat lievän kylmäshokin, joka voi vaikuttaa glukoosin imeytymiseen/puhdistumaan. Eri lämpötilaryhmissä havaittujen samankaltaisten paastoverensokeripitoisuuksien perusteella ympäristön lämpötilan muutokset eivät kuitenkaan välttämättä ole vaikuttaneet merkittävästi tuloksiin.
Kuten aiemmin mainittiin, viime aikoina on korostettu, että huonelämpötilan nostaminen saattaa heikentää joitakin kylmästressiin liittyviä reaktioita, mikä voi kyseenalaistaa hiiritietojen siirrettävyyden ihmisille. Ei kuitenkaan ole selvää, mikä on optimaalinen lämpötila hiirien pitämiseksi ihmisen fysiologian jäljittelemiseksi. Vastaukseen tähän kysymykseen voivat vaikuttaa myös tutkimusala ja tutkittava päätetapahtuma. Esimerkkinä tästä on ruokavalion vaikutus maksan rasvan kertymiseen, glukoosinsietoon ja insuliiniresistenssiin19. Energiankulutuksen osalta jotkut tutkijat uskovat, että termoneutraalisuus on optimaalinen lämpötila kasvatukselle, koska ihmiset tarvitsevat vain vähän ylimääräistä energiaa ydinlämpötilansa ylläpitämiseen, ja he määrittelevät aikuisten hiirten yhden kierroksen lämpötilaksi 30 °C7,10. Toiset tutkijat uskovat, että lämpötila, joka on verrattavissa lämpötilaan, jonka ihmiset tyypillisesti kokevat aikuisten hiirten ollessa yhdellä polvella, on 23–25 °C, koska he havaitsivat termoneutraaliuden olevan 26–28 °C ja ihmisten perusteella, että se on noin 3 °C alempi, heidän alempi kriittinen lämpötilansa, tässä määriteltynä 23 °C:ksi, on hieman 8,12. Tutkimuksemme on yhdenmukainen useiden muiden tutkimusten kanssa, joiden mukaan lämpötilaneutraaliutta ei saavuteta 26–28 °C:ssa4, 7, 10, 11, 24, 25, mikä viittaa siihen, että 23–25 °C on liian alhainen. Toinen tärkeä tekijä, joka on otettava huomioon hiirten huoneenlämpötilan ja lämpötilaneutraaliuden suhteen, on yksittäin tai ryhmässä pitäminen. Kun hiiriä pidettiin ryhmissä yksittäin pitämisen sijaan, kuten tutkimuksessamme, lämpötilaherkkyys heikkeni, mahdollisesti eläinten ahtauden vuoksi. Huoneenlämpötila oli kuitenkin edelleen alle 25 asteen lämpötilarajan, kun käytettiin kolmea ryhmää. Ehkä tärkein lajien välinen ero tässä suhteessa on BAT-aktiivisuuden määrällinen merkitys puolustuksena hypotermiaa vastaan. Vaikka hiiret suurelta osin kompensoivat suurempaa kalorien menetystä lisäämällä BAT-aktiivisuutta, joka on yli 60 % EE pelkästään 5 °C:ssa,51,52 ihmisen BAT-aktiivisuuden osuus EE:hen oli merkittävästi suurempi, paljon pienempi. Siksi BAT-aktiivisuuden vähentäminen voi olla tärkeä tapa lisätä ihmisen translaatiota. BAT-aktiivisuuden säätely on monimutkaista, mutta se välittyy usein adrenergisen stimulaation, kilpirauhashormonien ja UCP114,54,55,56,57-ilmentymisen yhteisvaikutusten kautta. Datamme osoittavat, että lämpötilaa on nostettava yli 27,5 °C:een verrattuna hiiriin 22 °C:ssa, jotta toiminnasta/aktivaatiosta vastaavien BAT-geenien ilmentymisessä voidaan havaita eroja. Ryhmien välillä 30 ja 22 °C:ssa havaitut erot eivät kuitenkaan aina osoittaneet BAT-aktiivisuuden lisääntymistä 22 °C:n ryhmässä, koska Ucp1:n, Adrb2:n ja Vegf-a:n ilmentyminen oli vähentynyt 22 °C:n ryhmässä. Näiden odottamattomien tulosten perimmäinen syy on vielä selvittämättä. Yksi mahdollisuus on, että niiden lisääntynyt ilmentyminen ei välttämättä heijasta kohonneen huoneenlämmön signaalia, vaan pikemminkin akuuttia vaikutusta siirtämisestä 30 °C:sta 22 °C:een poistopäivänä (hiiret kokivat tämän 5–10 minuuttia ennen lähtöä). ).
Tutkimuksemme yleinen rajoitus on, että tutkimme vain uroshiiriä. Muut tutkimukset viittaavat siihen, että sukupuoli voi olla tärkeä tekijä ensisijaisissa käyttöaiheissamme, koska yksipolviset naarashiiret ovat lämpötilaherkempiä korkeamman lämmönjohtavuuden ja tarkemmin kontrolloidun ydinlämpötilan ylläpitämisen vuoksi. Lisäksi naarashiiret (HFD:llä) osoittivat suuremman yhteyden energian saannin ja EE:n välillä 30 °C:ssa verrattuna uroshiiriin, jotka söivät enemmän samaa sukupuolta olevia hiiriä (tässä tapauksessa 20 °C)20. Siten naarashiirillä subtermoaritmisen pitoisuuden vaikutus on suurempi, mutta sillä on sama kaava kuin uroshiirillä. Tutkimuksessamme keskityimme yksipolvisiin uroshiiriin, koska useimmat EE:tä tutkivat aineenvaihduntatutkimukset suoritetaan näissä olosuhteissa. Tutkimuksemme toinen rajoitus oli, että hiiret olivat samalla ruokavaliolla koko tutkimuksen ajan, mikä esti huoneenlämmön merkityksen tutkimisen aineenvaihdunnan joustavuudelle (mitattuna RER-muutoksilla ruokavalion muutoksille eri makroravintoaineiden koostumuksissa). naaras- ja uroshiirillä, joita pidettiin 20 °C:ssa verrattuna vastaaviin hiiriin, joita pidettiin 30 °C:ssa.
Yhteenvetona voidaan todeta, että tutkimuksemme osoittaa, kuten muissakin tutkimuksissa, että ensimmäisen kierroksen normaalipainoiset hiiret ovat termoneutraaleja ennustetun 27,5 °C:n yläpuolella. Lisäksi tutkimuksemme osoittaa, että lihavuus ei ole merkittävä eristävä tekijä normaalipainoisilla tai DIO-hiirillä, mikä johtaa samankaltaisiin lämpötila:EE-suhteisiin DIO- ja normaalipainoisilla hiirillä. Vaikka normaalipainoisten hiirten ravinnonsaanti oli yhdenmukaista EE:n kanssa ja siten paino pysyi vakaana koko lämpötila-alueella, DIO-hiirten ravinnonsaanti oli sama eri lämpötiloissa, mikä johti suurempaan hiirten suhteeseen 30 °C:ssa ja 22 °C:ssa. Kaiken kaikkiaan systemaattiset tutkimukset, joissa tarkastellaan termoneutraalien lämpötilojen alapuolella elämisen mahdollista merkitystä, ovat perusteltuja, koska hiiri- ja ihmistutkimusten välillä havaitaan usein huonoa sietokykyä. Esimerkiksi lihavuustutkimuksissa osittainen selitys yleisesti heikommalle siirrettävyydelle voi johtua siitä, että hiirten painonpudotustutkimukset tehdään yleensä kohtalaisen kylmästressaaville eläimille, joita pidetään huoneenlämmössä niiden lisääntyneen EE:n vuoksi. Liioiteltu painonpudotus verrattuna henkilön odotettuun painoon, erityisesti jos vaikutusmekanismi perustuu EE:n lisäämiseen lisäämällä BAP:n aktiivisuutta, joka on aktiivisempi ja aktivoituneempi huoneenlämmössä kuin 30 °C:ssa.
Tanskan eläinkoelain (1987), kansallisten terveyslaitosten (julkaisu nro 85-23) sekä kokeellisiin ja muihin tieteellisiin tarkoituksiin käytettävien selkärankaisten suojelua koskevan eurooppalaisen yleissopimuksen (Euroopan neuvosto nro 123, Strasbourg, 1985) mukaisesti.
Kaksikymmentäviikkoiset urospuoliset C57BL/6J-hiiret hankittiin Janvier Saint Berthevin Cedexiltä Ranskasta, ja niille annettiin ad libitum standardiruokaa (Altromin 1324) ja vettä (~22 °C) 12:12 tunnin valo-pimeäsyklin jälkeen huoneenlämmössä. Urospuoliset DIO-hiiret (20 viikkoa) hankittiin samalta toimittajalta, ja niille annettiin ad libitum 45 % runsasrasvaista ruokavaliota (tuotenro D12451, Research Diet Inc., NJ, USA) ja vettä kasvatusolosuhteissa. Hiiret totutettiin ympäristöön viikkoa ennen tutkimuksen alkua. Kaksi päivää ennen siirtoa epäsuoraan kalorimetriajärjestelmään hiiret punnittiin, niille tehtiin magneettikuvaus (EchoMRITM, TX, USA) ja ne jaettiin neljään ryhmään painon, rasvaprosentin ja normaalipainon mukaan.
Tutkimusasetelman graafinen kaavio on esitetty kuvassa 8. Hiiret siirrettiin suljettuun ja lämpötilasäädeltyyn epäsuoraan kalorimetriajärjestelmään Sable Systems Internationalsilla (Nevada, USA). Järjestelmässä oli ruoan ja veden laadun seurantalaitteet sekä Promethion BZ1 -kehys, joka rekisteröi aktiivisuustasot mittaamalla säteen katkeamisia. XYZ. Hiiriä (n = 8) pidettiin yksittäin 22, 25, 27,5 tai 30 °C:ssa käyttäen kuivikkeita, mutta ilman suojaa ja pesämateriaalia, 12:12 tunnin valo-pimeäsyklissä (valo: 06:00–18:00). Virtausnopeus 2500 ml/min. Hiiriä totutettiin 7 päivää ennen rekisteröintiä. Tiedot kerättiin neljänä peräkkäisenä päivänä. Sen jälkeen hiiriä pidettiin vastaavissa lämpötiloissa 25, 27,5 ja 30 °C:ssa vielä 12 päivää, minkä jälkeen solukonsentraatit lisättiin alla kuvatulla tavalla. Samaan aikaan 22 °C:ssa pidettyjä hiiriryhmiä pidettiin tässä lämpötilassa vielä kaksi päivää (uusien lähtötietojen keräämiseksi), ja sitten lämpötilaa nostettiin 2 °C:n välein joka toinen päivä valovaiheen alussa (klo 06:00), kunnes saavutettiin 30 °C. Tämän jälkeen lämpötila laskettiin 22 °C:seen ja tietoja kerättiin vielä kaksi päivää. Kahden lisäpäivän jälkeen, jolloin tietoja oli kirjattu 22 °C:ssa, kaikkiin soluihin lisättiin nahat kaikissa lämpötiloissa, ja tiedonkeruu aloitettiin toisena päivänä (päivä 17) ja kolmen päivän ajan. Tämän jälkeen (päivä 20) pesämateriaalia (8–10 g) lisättiin kaikkiin soluihin valosyklin alussa (klo 06:00) ja tietoja kerättiin vielä kolme päivää. Näin ollen tutkimuksen lopussa 22 °C:ssa pidettyjä hiiriä pidettiin tässä lämpötilassa 21/33 päivää ja 22 °C:ssa viimeiset 8 päivää, kun taas muissa lämpötiloissa pidettyjä hiiriä pidettiin tässä lämpötilassa 33 päivää. Hiiriä ruokittiin tutkimusjakson ajan.
Normaalipainoiset ja DIO-hiiret noudattivat samoja tutkimusmenetelmiä. Päivänä -9 hiiret punnittiin, niille tehtiin magneettikuvaus ja ne jaettiin ryhmiin, joiden paino ja ruumiinkoostumus olivat vertailukelpoisia. Päivänä -7 hiiret siirrettiin suljettuun, lämpötilasäädeltyyn SABLE Systems Internationalin (Nevada, USA) valmistamaan epäsuoraan kalorimetriajärjestelmään. Hiiret pidettiin yksittäin kuivikkeiden kanssa, mutta ilman pesää tai suojaa. Lämpötila asetettiin arvoon 22, 25, 27,5 tai 30 °C. Viikon totuttelun jälkeen (päivät -7–0, eläimiä ei häiritty) tiedot kerättiin neljänä peräkkäisenä päivänä (päivät 0–4, tiedot esitetään kuvissa 1, 2 ja 5). Sen jälkeen 25, 27,5 ja 30 °C:ssa pidettyjä hiiriä pidettiin vakio-olosuhteissa 17. päivään asti. Samaan aikaan 22 °C:n ryhmän lämpötilaa nostettiin 2 °C:n välein joka toinen päivä säätämällä lämpötilasykliä (klo 6.00) valoaltistuksen alussa (tiedot on esitetty kuvassa 1). Päivänä 15 lämpötila laski 22 °C:seen ja kerättiin kahden päivän tiedot lähtötilanteen saamiseksi seuraavia käsittelyjä varten. Kaikille hiirille lisättiin nahat päivänä 17 ja pesämateriaalia päivänä 20 (kuva 5). 23. päivänä hiiret punnittiin ja niille tehtiin magneettikuvaus, minkä jälkeen ne jätettiin rauhaan 24 tunniksi. Päivänä 24 hiiret pidettiin paastossa valojakson alusta (klo 6.00) ja ne saivat OGTT:tä (2 g/kg) klo 12.00 (6–7 tuntia paastoa). Sen jälkeen hiiret palautettiin vastaaviin SABLE-olosuhteisiinsa ja lopetettiin toisena päivänä (päivä 25).
DIO-hiiret (n = 8) noudattivat samaa protokollaa kuin normaalipainoiset hiiret (kuten yllä ja kuvassa 8 on kuvattu). Hiiret säilyttivät 45 %:n HFD:n koko energiankulutuskokeen ajan.
VO2 ja VCO2 sekä vesihöyrynpaine tallennettiin 1 Hz:n taajuudella ja kennoaikavakion ollessa 2,5 minuuttia. Ruoan ja veden saanti kerättiin tallentamalla jatkuvasti (1 Hz) ruoka- ja vesiämpärien painoa. Käytetty laatumittari raportoi 0,002 g:n resoluution. Aktiivisuustasot tallennettiin 3D XYZ -sädematriisimonitorilla. Tiedot kerättiin 240 Hz:n sisäisellä resoluutiolla ja raportoitiin sekunnin välein kuljetun kokonaismatkan (m) kvantifioimiseksi 0,25 cm:n tehokkaalla spatiaalisella resoluutiolla. Tiedot käsiteltiin Sable Systems Macro Interpreter v.2.41 -ohjelmalla, joka laski EE:n ja RER:n ja suodatti pois poikkeavat arvot (esim. väärät ateriat). Makrotulkki on konfiguroitu tuottamaan tiedot kaikista parametreista viiden minuutin välein.
EE:n säätelyn lisäksi ympäristön lämpötila voi säädellä myös muita aineenvaihdunnan osa-alueita, mukaan lukien aterianjälkeistä glukoosiaineenvaihduntaa, säätelemällä glukoosia metaboloivien hormonien eritystä. Tämän hypoteesin testaamiseksi suoritimme lopulta ruumiinlämpötilan tutkimuksen provosoimalla normaalipainoisia hiiriä DIO-glukoosiannoksella oraalisesti (2 g/kg). Menetelmät on kuvattu yksityiskohtaisesti lisämateriaaleissa.
Tutkimuksen lopussa (päivä 25) hiiret paastosivat 2–3 tuntia (alkaen klo 06.00), nukutettiin isofluraanilla ja ne vuodatettiin kokonaan retroorbitaalisella laskimopunktiolla. Plasman lipidien ja hormonien sekä maksan lipidien kvantifiointi on kuvattu lisämateriaaleissa.
Jotta voitaisiin selvittää, aiheuttaako kuoren lämpötila rasvakudoksessa lipolyysiin vaikuttavia sisäisiä muutoksia, hiiriltä poistettiin nivus- ja lisäkivesrasvakudosta suoraan verenvuodon viimeisen vaiheen jälkeen. Kudokset käsiteltiin käyttämällä uutta ex vivo -lipolyysimääritystä, joka on kuvattu lisämenetelmissä.
Ruskea rasvakudos (BAT) kerättiin tutkimuksen päättymispäivänä ja käsiteltiin lisämenetelmissä kuvatulla tavalla.
Tiedot esitetään keskiarvona ± SEM. Kaaviot luotiin GraphPad Prism 9:llä (La Jolla, CA) ja grafiikat muokattiin Adobe Illustratorilla (Adobe Systems Incorporated, San Jose, CA). Tilastollinen merkitsevyys arvioitiin GraphPad Prismillä ja testattiin parillisella t-testillä, toistettujen mittausten yksi-/kaksisuuntaisella ANOVA:lla ja sen jälkeen Tukeyn monivertailutestillä tai parittomalla yksisuuntaisella ANOVA:lla ja sen jälkeen Tukeyn monivertailutestillä tarpeen mukaan. Tietojen Gaussinen jakauma validoitiin D'Agostino-Pearsonin normaaliustestillä ennen testausta. Otoskoko on ilmoitettu "Tulokset"-osion vastaavassa osiossa sekä selitteessä. Toisto määritellään samaksi eläimeksi (in vivo tai kudosnäytteestä) tehdyksi mittaukseksi. Tietojen toistettavuuden osalta energiankulutuksen ja tapauksen lämpötilan välinen yhteys osoitettiin neljässä riippumattomassa tutkimuksessa, joissa käytettiin eri hiiriä samanlaisella tutkimusasetelmalla.
Yksityiskohtaiset kokeelliset protokollat, materiaalit ja raakatiedot ovat saatavilla kohtuullisesta pyynnöstä pääkirjoittajalta Rune E. Kuhrelta. Tässä tutkimuksessa ei tuotettu uusia ainutlaatuisia reagensseja, transgeenisiä eläin-/solulinjoja tai sekvensointitietoja.
Lisätietoja tutkimusasetelmasta on tässä artikkelissa linkitetyssä Nature Research Report -abstraktissa.
Kaikki tiedot muodostavat graafin. Kohdat 1–7 on tallennettu Science-tietokannan arkistoon, käyttöoikeusnumero: 1253.11.sciencedb.02284 tai https://doi.org/10.57760/sciencedb.02284. ESM:ssä näkyvät tiedot voidaan lähettää Rune E Kuhrelle kohtuullisten testausten jälkeen.
Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. Laboratorioeläimet ihmisen lihavuuden sijaismalleina. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. Laboratorioeläimet ihmisen lihavuuden sijaismalleina.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. ja Tang-Christensen M. Laboratorioeläimet ihmisen lihavuuden sijaismalleina. Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. 实验动物作为人类肥胖的替代模型。 Nilsson, C., Raun, K., Yan, FF, Larsen, MO & Tang-Christensen, M. Koe-eläimet ihmisen korvaavana mallina.Nilsson K, Raun K, Yang FF, Larsen MO. ja Tang-Christensen M. Laboratorioeläimet ihmisten lihavuuden sijaismalleina.Acta Pharmacology. Crime 33, 173–181 (2012).
Gilpin, DA Uuden Mie-vakion laskeminen ja palamiskoon kokeellinen määritys. Burns 22, 607–611 (1996).
Gordon, SJ Hiiren lämmönsäätelyjärjestelmä: sen vaikutukset biolääketieteellisen tiedon siirtoon ihmisille. Fysiologia. Käyttäytyminen. 179, 55-66 (2017).
Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Ei lihavuuden eristävää vaikutusta. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Ei lihavuuden eristävää vaikutusta.Fischer AW, Chikash RI, von Essen G., Cannon B. ja Nedergaard J. Ei liikalihavuuden eristysvaikutusta. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. 肥胖没有绝缘作用. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Ожирение не имеет изолирующего эффекта. Fischer, AW, Csikasz, RI, von Essen, G., Cannon, B. & Nedergaard, J. Lihavuudella ei ole eristävää vaikutusta.Kyllä. J. Physiology. endokriininen. aineenvaihdunta. 311, E202–E213 (2016).
Lee, P. ym. Lämpötilasopeutunut ruskea rasvakudos säätelee insuliiniherkkyyttä. Diabetes 63, 3686–3698 (2014).
Nakhon, KJ ym. Alhaisempi kriittinen lämpötila ja kylmän aiheuttama termogeneesi olivat kääntäen verrannollisia painoon ja perusaineenvaihdunnan nopeuteen sekä hoikilla että ylipainoisilla henkilöillä. J. Warmly. biology. 69, 238–248 (2017).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Hiirten optimaaliset kasvatuslämpötilat ihmisen lämpöympäristön jäljittelemiseksi: kokeellinen tutkimus. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Hiirten optimaaliset kasvatuslämpötilat ihmisen lämpöympäristön jäljittelemiseksi: kokeellinen tutkimus.Fischer, AW, Cannon, B., ja Nedergaard, J. Optimaaliset sisälämpötilat hiirille ihmisen lämpöympäristön jäljittelemiseksi: Kokeellinen tutkimus. Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. 小鼠模拟人类热环境的最佳住房温度：一项实验研究。 Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher AW, Cannon B. ja Nedergaard J. Optimaalinen kotelolämpötila hiirille, joka simuloi ihmisen lämpöympäristöä: kokeellinen tutkimus.Moore. Metabolism. 7, 161–170 (2018).
Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR Mikä on paras kotelointilämpötila hiirikokeiden soveltamiseksi ihmisiin? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR Mikä on paras kotelointilämpötila hiirikokeiden soveltamiseksi ihmisiin?Keyer J, Lee M ja Speakman JR Mikä on paras huoneenlämpötila hiirikokeiden siirtämiseen ihmisiin? Keijer, J., Li, M. & Speakman, JR 将小鼠实验转化为人类的最佳外壳温度是多少？ Keijer, J., Li, M. & Speakman, JRKeyer J, Lee M ja Speakman JR Mikä on optimaalinen kuoren lämpötila hiirikokeiden siirtämiseksi ihmisiin?Moore. Metabolia. 25, 168–176 (2019).
Seeley, RJ & MacDougald, OA Hiiret ihmisen fysiologian kokeellisina malleina: kun useilla asteilla asumislämpötilassa on merkitystä. Seeley, RJ & MacDougald, OA Hiiret ihmisen fysiologian kokeellisina malleina: kun useilla asteilla asumislämpötilassa on merkitystä. Seeley, RJ & MacDougald, OA Мыши как экспериментальные модели для физиологии человека: когда несколько градусов весколько градусов значение. Seeley, RJ & MacDougald, OA Hiiret ihmisen fysiologian kokeellisina malleina: kun muutama aste asunnossa tekee eron. Seeley, RJ & MacDougald, OA 小鼠作为人类生理学的实验模型：当几度的住房温度很重要旦很重要 Seeley, RJ ja MacDougald, OA Мыши Seeley, RJ & MacDougald, OA как экспериментальная модель физиологии человека: когда несколько градусов температу имеют значение. Seeley, RJ & MacDougald, OA-hiiret ihmisen fysiologian kokeellisena mallina: kun muutamalla asteella huoneenlämpöä on merkitystä.Kansallinen aineenvaihdunta. 3, 443–445 (2021).
Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Vastaus kysymykseen ”Mikä on paras kotelolämpötila hiirikokeiden soveltamiseksi ihmisiin?” Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Vastaus kysymykseen ”Mikä on paras kotelolämpötila hiirikokeiden soveltamiseksi ihmisiin?” Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. Vastaus kysymykseen ”Mikä on paras huoneenlämpötila hiirikokeiden siirtämiseen ihmisiin?” Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J. 问题的答案"将小鼠实验转化为人类的最佳外壳温度是够" Fischer, AW, Cannon, B. & Nedergaard, J.Fisher AW, Cannon B. ja Nedergaard J. Vastauksia kysymykseen ”Mikä on optimaalinen kuoren lämpötila hiirikokeiden siirtämiseksi ihmisiin?”Kyllä: termoneutraali. Moore. metabolia. 26, 1–3 (2019).
Julkaisun aika: 28.10.2022
